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              基因突變體文庫構建技術原理

              更新時間:2021-10-19   點擊次數:1069次

              分子定向進化模擬自然選擇過程,改變原有蛋白的氨基酸序列,以期獲得具有功能的突變蛋白?;蛲蛔兾膸焓荄NA變體序列的組合,是基因合成、基因突變和定向進化研究相結合的產物?;蛲蛔兾膸煲呀浽絹碓蕉嗟貞糜谘芯款I域,如高通量藥物靶點篩選,蛋白質工程定向進化,合成多樣性抗體庫用來篩選高親和力和特異性的變異抗體等。

              丙氨酸掃描文庫(Alanine Scan Library)

              通過用丙氨酸逐一取代每一個位置或關鍵位置的氨基酸,發現對蛋白功能、相互作用和形態具有重要功能的氨基酸殘基。

              隨機突變文庫(Randomized mutant libraries)

              憑借我們的基因合成技術,能夠在合成DNA片段上生成多種形式的隨機突變基因,實現可控的隨機化。體外文庫合成技術能夠引入具有可控靈活性的隨機突變。

              定點飽和突變文庫

              通過對目的蛋白的編碼基因進行改造,對不同位點的氨基酸分別進行19個氨基酸的替換,用于研究篩查功能性氨基酸殘基。

              應用領域

              • 篩選具有改良性狀(高親和力、特異性)的抗體、配體及受體等;

              • 自然界中現存的生物酶的催化功能或自然界中不存在的生物酶[1];

              • DNA疫苗、蛋白表達、基因治療;

              • 分子定向進化、研究蛋白質結構和功能關系、探討基因調控機制等[2]。

              參考文獻
              [1] Williams G J, Domann S, Nelson A, et al. Modifying the stereochemistry of an enzyme-catalyzed reaction by directed evolution[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences, 2003, 100(6): 3143-3148.
              [2] Wang T W, Zhu H, Ma X Y, et al. Mutant library construction in directed molecular evolution[J]. Molecular biotechnology, 2006, 34(1): 55-68.


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